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[size=4][color=Blue][size=4][font=黑体][求助]RNA抽提为何是很白的产物!
大家好!
我最近做RT-PCR ,使用的是C6细胞株,但是收集细胞TRIZOL裂解后,提取RNA ,所得产物是
2011年10月19日发布人:泡泡
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多,仍可消化过夜),然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。,自己手提的是吧?最好一次提取用的菌液少点,这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到
2015年01月25日发布人:zouyou
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超过2ug了
看不见沉淀,小心一点操作,还是可以做下去的
不过如果真的象你所说的那样,10^6细胞得到的RNA就太少了
你用的什么方法抽提的?应该是TRIzol吧,用什么方法破碎细胞的?充分吗?
另外样品中加入糖原可以适当提高RNA的
2011年10月10日发布人:wiwi
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脂肪组织中抽提RNA前也查了一些文献,看到zhongzidegushi说的那条信息,咨询Trizol产品公司,建议用柱式RNA进行抽提,但考虑到麻烦,于是进行了一下尝试,用普通的Trizol进行抽提,并进行RT-PCR,最后电泳,结果很好,条带
2011年10月22日发布人:lgm
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我是刚进入实验,准备做RNA的FQ-PCR。先准备从病人血提RNA,用RBC裂解液收集WBC,提RNA,反转,PCR,电泳看看效果。可每次总是不理想。RNA量很少,有时甚至没沉淀。不知错在哪环节。RNA很不稳定,提取时
2015年11月10日发布人:fei1226com
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重点在于DNA的纯度,即减少或避免RNA、蛋白的污染很重要。因此在提取过程中需使用蛋白酶K及RNA酶以去除两者。
使用两者的细节:
1:蛋白酶K可以使用灭菌双蒸水配制成20mg/ml;
2:RNA酶必须要配制成不含DNA酶的RNA酶
2011年09月02日发布人:finger
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各位大虾,请问在提取组织中的病毒RNA时,加异丙醇后即出现絮状沉淀,可能是吸入了蛋白质,还有必要继续往后做吗?还能提得出RNA吗?或者能不能把絮状沉淀低速离心去掉,取上清再接着做呢?请高手指点一二啊![/size
2016年02月09日发布人:@STAR@
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管比值在2.0.这个对比说明什么问题呢?操作有什么技巧吗?提RNA的得率和纯度总是不稳定,有时高,有时低,而我们科室有个师姐每次提的比值都在1.9-2.0左右,原来看她提过一次,但也分析不出和用TRIZOL作用20分钟后,转裂解液入EP管
2011年10月12日发布人:少林弟子
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的比值都在1.9-2.0左右,原来看她提过一次,但也分析不出和用TRIZOL作用20分钟后,转裂解液入EP管,加入1/5体积氯仿, 剧烈振摇30秒,静置15分钟后,发现很多管TRIZOL 与氯仿分层都不明显; 而只有1管分层明显; 提RNA
2015年08月03日发布人:H2O
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多,仍可消化过夜),然后取一点电泳看看RNA是否已去除。
作为要求严格的实验在消化后最好再进行氯仿抽提一下去除RNase,视你后续实验而定。,自己手提的是吧?最好一次提取用的菌液少点,这样消化起来也更快更干净。RNase A一般浓度达到
2015年12月01日发布人:malong